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凝膠電泳常見問題分析

要跑瓊脂糖凝膠電泳，5ng就能很清楚的跑出來是這樣嗎？能夠照相的清楚的條帶，至少需要多少量呢？參考見解：5ng已經(jīng)可以了，但是或許20ng50ng-200ng效果好，在此范圍內(nèi)呈線性。把210bp的pcr產(chǎn)物進行酶切,得到190+20bp的兩個片段,請問能用瓊脂糖凝膠電泳檢測酶切結果嗎?用多大濃度的膠和多大的電壓呢?參考見解：可以用瓊脂糖凝膠電泳分開,電壓不變,可用1.5%到2%的膠,20bp得片斷不一定能看得到,所以應用未酶切的PCR片斷作對照.瓊脂糖濃度（W/V）大小范圍...

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滴定管的使用方法

一、滴定管的構造及其準確度（1）構造滴定管是容量分析中zui基本的測量儀器，它是由具有準確刻度的細長玻璃管及開關組成。滴定管是容量分析中zui基本的測量儀器，是在滴定時用來測定自管內(nèi)流出溶液的體積。（2）準確度常量分析用的滴定管為50ml或25ml，刻度小至0.1ml，讀數(shù)可估計到0.01ml，一般有±0.02ml的讀數(shù)誤差，所以每次滴定所用溶液體積在20ml以上，若滴定所用體積過小，則滴定管刻度讀數(shù)誤差影響增大。二、滴定管的種類（1）酸式滴定管（玻塞滴定管）酸...

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實時熒光定量PCR技術及在我國衛(wèi)生應急中的應用

實時熒光定量PCR技術（Real-timequantitativePolymeraseChainReaction簡稱RealTimePCR，如果用于RNA檢測，這被稱為逆轉(zhuǎn)錄實時PCR即Real-timeRT-PCR）是實時PCR法，它是指對DNA或經(jīng)過反轉(zhuǎn)入（RT-PCR）的RNA通過聚合酶鏈式反應并實時監(jiān)測DNA的放大過程，在擴增的指數(shù)增長期就測量擴增產(chǎn)物，因為擴增指數(shù)增長期測量值與特異DNA（RNA）起始量存在相關性，從而實現(xiàn)定量檢測。RealTimePCR的基本目標是...

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多肽合成的研究及應用現(xiàn)狀

1，多肽合成的研究歷史多肽合成研究已經(jīng)走過了一百多年的光輝歷程，1902年，EmilFischer首先開始關注多肽合成，由于當時在多肽合成方面的知識太少，進展也相當緩慢，直到1932年，MaxBergmann等人開始使用芐氧羰基（Z）來保護α-氨基，多肽合成才開始有了一定的發(fā)展。到了20世紀50年代，有機化學家們合成了大量的生物活性多肽，包括催產(chǎn)素，胰島素等，同時在多肽合成方法以及氨基酸保護基上面也取得了不少成績，這為后來的固相合成方法的出現(xiàn)提供了實驗和理論基礎。1963年，...

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凝膠電泳實驗的一些注意事項

影響電泳分離的主要因素：1.待分離生物大分子的性質(zhì)：待分離生物大分子所帶的電荷、分子大小和性質(zhì)都會對電泳有明顯影響。一般來說，子帶的電荷量越大、直徑越小、形狀越接近球形，則其電泳遷移速度越快。2.緩沖液的性質(zhì)：緩沖液的pH值會影響待分離生物大分子的解離程度，從而對其帶電性質(zhì)產(chǎn)生影響，溶液pH值距離其等電點愈遠，其所帶凈電荷量就越大，電泳的速度也就越大，尤其對于蛋白質(zhì)等兩性分子，緩沖液pH還會影響到其電泳方向，當緩沖液pH大于蛋白質(zhì)分子的等電點，蛋白質(zhì)分子帶負電荷，其電泳的方向...

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